دانشگاه شیراز

دانشکده علوم

پایان نامه کارشناسی ارشد در رشته زیست شناسی (فیزیولوژی جانوری)

اثرات لینالول بر الگوی فعالیت نورونی حلزون و بر همکنش با مکانیسم های سلولی دخیل در القای فعالیت صرعی

استاد راهنما:

دکتر جعفر وطن پرست

شهریور۱۳۹۲

 
 
 
چکیده
لینالول، مونوترپن الکلی است که در اسانس روغنی تعدادی از گیاهان آروماتیک وجود دارد. این ترکیب اثرات ضد التهابی، ضد درد و انواعی از اثرات بیولوژیک بر سیستم عصبی را داراست. در تحقیق حاضر، ما تکنیک ثبت داخل سلولی را برای مطالعه اثرات لینالول بر فعالیت نورون­های حلزون به کار بردیم. اعمال لینالول (mM 1/0) به سرعت فرکانس پتانسیل­های عمل خود­به­خودی را افزایش و شیب فاز رپلاریزاسیون و دوره و دامنه پتانسیل هایپرپولاریزان متعاقب را کاهش داد. لینالول همچنین دامنه پتانسیل­ عمل را کاهش داد اما به نظر می­رسد این تاثیر نتیجه دپلاریزاسیون آهسته غشاء باشد و نه مهار مستقیم کانالهای سدیمی زیرا با تثبیت ولتاژ استراحت غشاء در حدود کنترل (با تزریق مداوم جریان منفی) کاهش دامنه پتانسیل­های عمل هم حذف ­گردید. اعمال لینالول ( mM2/0) به تدریج الگوی فعالیت را از حالت منظم به فعالیت انفجاری تغییر داد که این الگوی فعالیت بعد از شستشو با رینگر نرمال به آهستگی برگشت­پذیر بود. فعالیت انفجاری در حضور نیفدیپین (مهارکننده اختصاصی کانالهای کلسیمی L-type) کاهش و در حضور نیکل کلرید (مهارکننده غیر اختصاصی کانالهای کلسیمی) حذف شد. افزودن H89 (مهارکننده­ پروتئین کینازA) و کلریترین (مهارکننده­ پروتئین کینازC) فعالیت انفجاری القاء شده توسط لینالول را حذف کرد و سبب بازگشت پتانسیل­های عمل منفرد و منظم شد. این نتایج پیشنهاد می­ کند لینالول می ­تواند فعالیت صرعی را به ویژه از طریق مهار کانال­های پتاسیمی در نورون­های حلزون القاء نماید. به نظر می­رسد تاثیر مستقیم لینالول بر کانال­های یونی در تغییر فعالیت نورون­ها نقش داشته باشد که با شروع سریع تاثیر لینالول مطابقت دارد، اما با توجه به تاثیر مهارکننده­های پروتئین کینازها این تاثیر به تعدیل غیرمستقیم از طریق فسفریلاسیون کانال­های یونی نیز وابسته است.
کلمات کلیدی: پتانسیل عمل، لینالول، نورون حلزون، فعالیت انفجاری، کانال‌های یونی
 
 
 
 
 
فهرست مطالب
 
 
عنوانصفحه
 
فصل اول: مقدمه
۱-۱) بیان مساله ۲
۱–۲) دلایل استفاده از نورونهای حلزون . ۵
فصل دوم: مروری بر تحقیقات پیشین
۲-۱) صرع .  ۸
۲-۲) اسانس­های گیاهی .  ۹
۲-۳) اثرات بیولوژیک اسانس های گیاهی  ۱۰
۲-۳-۱) اثرات سیتوتوکسیک اسانس­ها   ۱۰
۲-۳-۲) اثرات موتاژنیک اسانس­ها در سطح هسته و سیتوپلاسم . ۱۰
۲-۳-۳) اثرات انتی موتانژنیک اسانس­ها۱۰
 ۲-۳-۴) اثرات سرطان­زایی اسانس­ها۱۱
۲-۴) ترکیبات اسانس­ها و عملکرد آن­ها روی سیستم عصبی مرکزی و محیطی ۱۱
۲-۴-۱) اکالیپتول . ۱۲
۲-۴-۲) اوجنول .۱۳
۲-۴-۳)منتول . ۱۳
۲-۴-۴) سیترونلول ... ۱۴
۲-۴-۵) لینالول...۱۵
۲-۵) کانال­های یونی و مشارکت آنها در فعالیت الکتریکی نورون ها ۱۷
۲-۵-۱)کانال های کلسیمی . ۱۷
۲-۵-۲) کانالهای پتاسیمی . ۱۹
۲-۵-۲-۱) کانال های پتاسیمی وابسته به ولتاژ . ۱۹
۲-۵-۲-۲) کانالهای پتاسیمی وابسته به کلسیم . ۲۰
۲-۵-۳) کانالهای سدیمی .. . ۲۱
۲-۵-۳-۱) جریانهای سدیمی گذرا و مداوم .  ۲۲
۲-۶) تعدیل کانال های یونی توسط فسفوریلاسیون ۲۳
۲-۶-۱) گیرنده متابوتروپیک. ۲۳
۲-۷) پروتئین کینازها..۲۵
۲-۷-۱) PKA و اثر بر کانال های یونی ۲۵
 
۲-۷-۲) PKC و اثر بر کانال های یونی .. ۲۷
فصل سوم: مواد و روش­ها
۳-۱) حیوانات .. ۳۰
۳–۲) تشریح و آماده سازی گانگلیون عصبی جهت ثبت ۳۱
۳-۳) محلول­ها و داروها .. ۳۲
۳-۴) ثبت داخل سلولی . ۳۲
۳-۵) مراحل آزمایش ... ۳۴
۳-۶) پارامترهای الکتروفیزیولوژیک مورد مطالعه . ۳۴
۳-۷) آزمون آماری ۳۶
فصل چهارم: نتایج
۴-۱) ویژگی های فعالیت خودبخودی و برانگیخته نورون های حلزون در شرایط کنترل. ۳۸
۴-۲) اثرات غلظت­های ۱/۰ و ۲/۰ میلی­مولار لینالول بر ویژگی­های الکتروفیزیولوژیک نورون­های حلزون ۳۹
۴-۲-۱) ویژگی های پتانسیل عمل خود بخودی در حضور لینالول ۱/۰ میلی مولار ۳۹
۴-۲-۲) ویژگی های پتانسیل عمل خودبخودی در حضور لینالول ۲/۰ میلی مولار .۴۷
۴-۳) ویژگی های پتانسیل عمل خودبخودی در حضور لینالول و مهار کننده های کانال های کلسیمی نیکل کلرید و نیفدیپین ۵۱
 
 
۴-۴) ویژگی های پتانسیل عمل خودبخودی در حضور لینالول و مهارکننده­های  پروتئین کینازها،کلریترین و H89 53
فصل پنجم: بحث و نتیجه گیری
۵-۱) بحث ۵۷
۵-۱-۱) تغییر در ویژگی های پتانسیل عمل در حضور لینالول . ۵۷
۵-۱-۲) تغییر در فعالیت نورونی و بروز الگوی burst در حضور لینالول...۶۰
۵-۲) نتیجه گیری . ۶۳
۵-۳) پیشنهادات برای مطالعات آینده ۶۳
فهرست منابع و ماخذ ۶۵
 
 
 
فهرست شکل­ها
 
 
عنوانصفحه
 
شکل ۳-۱. حلزون باغی .. ۳۰
شکل ۳-۲.گانگلیون تحت مری تثبیت شده در محفظه ثبت . ۳۱
شکل ۳-۳. نمایی از وسایل ثبت داخل سلولی ۳۳
شکل ۳-۴. نحوه اندازه گیری برخی پارامترهای پتانسیل عمل .. ۳۵
شکل۴-۱. الگوی فعالیت خودبخودی نورون در شرایط کنترل، ۵ و ۱۰ دقیقه پس از مجاورت با غلظت ۱/۰ میلی مولار لینالول ۴۰
شکل ۴-۲. مقایسه پتانسیل ثبت شده از یک نورون در سه زمان کنترل، ۵ دقیقه و ۱۰ دقیقه پس از افزودن لینالول . ۴۲
شکل ۴-۳. الگوی فعالیت خودبخودی در شرایط کنترل، ۳ دقیقه پس از مجاورت با غلظت ۲/۰ میلی مولار لینالول و پس از شستشوی محفظه حاوی لینالول با رینگر نرمال حلزون ۴۸
 
 
شکل۴-۴. مقایسه پتانسیل ثبت شده از یک نورون در دو زمان کنترل و ۲ دقیقه پس از افزودن لینالول ۲/۰ میلی مولار ۴۹
شکل ۴-۵. پس از بروز فعالیت burst در نتیجه افزودن لینالول ۲/۰ میلی مولار NiCl به محفظه ثبت اضافه گردید ۵۲
شکل ۴-۶. پس از بروز فعالیت burst در نتیجه افزودن لینالول ۲/۰ میلی مولار، نیفدیپین به محفظه ثبت اضافه گردید .. ۵۳
شکل ۴-۷. پس از بروز فعالیت burst در نتیجه افزودن لینایول ۲/۰ میلی مولار، H89 به محفظه ثبت اضافه گردید . ۵۴
شکل ۴-۸. پس از بروز فعالیت burst در نتیجه افزودن لینالول ۲/۰ میلی مولار، کلریترین به محفظه ثبت اضافه گردید ... ۵۵
 
 
فهرست نمودارها و جدول­ها
 
 
عنوانصفحه
 
نمودار ۴-۱. مقایسه میانگین پتانسیل استراحت غشاء و فرکانس پتانسیل عمل در شرایط کنترل و در ۵ و ۱۰ دقیقه پس از افزودن غلظت ۱/۰ میلی مولار لینالول به رینگر حلزونی نرمال.۳۹
نمودار ۴-۲. مقایسه استانه و دامنه در  پتانسیل عمل ثبت شده در حضور غلظت ۱/۰ میلی ­مولار لینالول . ۴۱
نمودار ۴-۳. مقایسه میانگین سطح زیر منحنی، فاصله بین پتانسیل‌های عمل و طول مدت پتانسیل عمل در شرایط کنترل و در ۵ و ۱۰ دقیقه پس از افزودن غلظت ۱/۰ میلی مولار لینالول به رینگر حلزونی نرمال (۸=n) 43
نمودار ۴-۴. مقایسه میانگین دامنه AHP و طول مدت AHP بین سه حالت کنترل، ۵ و ۱۰ دقیقه پس از کاربرد لینالول ۱/۰ میلی مولار (۸=n) 44
نمودار ۴-۵. مقایسه میانگین شیب فاز دپلاریزاسیون و شیب  فاز رپلاریزاسیون بین سه حالت کنترل، ۵ و ۱۰ دقیقه پس از افزودن لینالول ۱/۰ میلی مولار (۸₌n) 45
نمودار ۴-۶. مقایسه میانگین مدت دوره مهاری بعد از فعالیت برانگیخته پس از تزریق جریان های دپلاریزان (nA1-2) در شرایط کنترل و ۱۰ دقیقه پس از افزودن غلظت ۱/۰ میلی مولار لینالول به رینگر حلزونی نرمال (۶=n) 46
نمودار ۴-۷. مقایسه آستانه و دامنه در پتانسیل های عمل ثبت شده در حضور غلظت ۲/۰ میلی مولار لینالول(۶₌n) . 47
نمودار ۴-۸.مقایسه میانگین شیب فاز دپلاریزاسیون و شیب  فاز رپلاریزاسیون بین دو حالت کنترل و ۲ دقیقه پس از افزودن لینالول ۲/۰ میلی مولار (۸₌n). 49
نمودار ۴-۹. مقایسه میانگین مدت دوره مهاری بعد از فعالیت برانگیخته پس از تزریق جریان‌های دپلاریزان(nA2-1) در شرایط کنترل و در ۱۰ دقیقه پس از افزودن غلظت ۲/۰ میلی مولار لینالول به رینگر حلزونی نرمال (۶=n)50
جدول ۴-۱. مقاومت ورودی سلول در شرایط کنترل و ۱۰ دقیقه پس از کاربرد لینالول ۱/۰ میلی مولار ۴۷
جدول ۴-۲. مقاومت ورودی سلول در شرایط کنترل و ۱۰ دقیقه پس از کاربرد لینالول ۲/۰ میلی مولار
۵۰
بیان مساله
 
صرع از جمله اختلالات سیستم عصبی مرکزی است که در آن یک ناحیه محدود مغزی و یا نواحی گسترده­ای از مغز فعالیت­های کنترل نشده خود­بخودی نشان می­ دهند. این بیماری مجموعه ­ای از سندرم­های جداگا­نه است که یا اولیه­اند ویا متعاقب صدما­ت مغزی به وجود می­آیند. کانون صرع­زا می ­تواند به وسیله فاکتورهای متفاوت و متنوع ژنتیکی و محیطی ایجاد شود (Cavalheiro et al., 1991; Lopez da Silva et al., 1992). شواهدی مبنی بر دخالت تغییر در سیستم­های نوروترنسمیتری مختلف به ویژه گلوتامات، آسپارتات و گابا در ایجاد صرع وجود دارد (Pinto et al., 2005). به طور کلی تغییر در الگوی فعالیت سیناپس­ها و مختل شدن عملکرد کانال­های یونی، بعنوان مکانیسم­های اصلی زمینه­ساز حمله­های صرعی شناخته شده ­اند (Nobels, 2003; Wuttke and Lerche, 2006).
اسانس­های گیاهی[۱] و انواع عصاره­های گیاهی از رایج­ترین فراورده­های استخراجی از گیاهان هستند که در طب سنتی و نوین جهت درمان صرع مصرف می­شوند. اسانس­های روغنی به دلیل تبخیر شدن در دماهای معمولی روغن­های فرار نیز نامیده می­شوند. ترپن­ها[۲] و فنیل­پروپانوئیدها[۳] دو دسته گسترده از اسانس­های روغنی هستند (de Almeida et al., 2011). این محصولات حاوی طیف وسیعی از ترکیبات با ویژگی­های ساختمانی متنوع هستند که برخی از آنها قادرند از بروز الگوی فعالیت صرعی در نورون­ها جلوگیری کنند. اثرات درمانی چنین ترکیباتی غالباً برایند برهم کنش و تاثیر چندین ترکیب است که می­توانند تقویت کننده (سینرژیک) یا مخالف هم باشند. تصور عمومی مبنی بر بی­ضرر بودن فراورده­های گیاهی باعث شده که در بسیاری موارد بیماران به خود درمانی با چنین محصولاتی روی آورند و حتی پزشک معالج خود را از مصرف چنین ترکیباتی آگاه نکنند که می ­تواند برهم­کنش نامطلوب با داروهای تجویز شده توسط پزشک را به دنبال داشته باشد (Spinella, 2001; Ruha et al., 2003). شناسایی مکانیسم­های دخیل در اثرات فراورده­ای گیاهی با پتانسیل درمانی می ­تواند ضمن کمک به کاربرد موثرتر آنها در درمان صرع از بروز برهم­کنش­های نامطلوب نیز جلوگیری نماید.
مونوترپن­ها از جمله رایج­ترین ترکیباتی هستند که هم در فراورده­های گیاهی با اثر صرع زا[۴] و هم فراورده­هایی با اثرات ضد صرعی حضور دارند (Burkhard et al., 1999). این ترکیبات با فرمول مولکولیC₁₀H₁₆  به طور وسیعی در گیاهان و به ویژه در اسانس­های روغنی یافت می شوند (Ishida, 2005) و با تعدیل سیستم گاباارژیک و گلوتاماترژیک اثرات ضد صرعی خود را اعمال می­ کنند (Sayyah et al., 2004). به برخی از مونوترپن­ها از جمله لینالول[۵]، اوجنول[۶]، منتول[۷] و لیمونن[۸] اثرات ضد­صرعی نسبت داده شده است (Burkhard et al., 1999).
لینالول، مونوترپنی است که به عنوان ترکیب اصلی در بسیاری از اسانس­های روغنی معطر وجود دارد. مطالعات متعددی تاثیر آرام­بخشی و ضد صرعی لینالول را گزارش کرده­اند. گیاهانی مانند گشنیز Coriandrum sativum و برگ­بو Laurus nobilis که در طب سنتی به عنوان ترکیبات ضد تشنج به کار رفته و اثرات ضد صرعی آنها تایید شده حاوی لینالول هستند (Elisabetsky et al., 1995; Sayyah et al., 2002). اثرات آرام­بخشی و خواب­آوری روغن Aniba rosaeodora، به میزان بالای لینالول در آن نسبت داده شده است (de Almeida et al., 2009a).
رسپتورهای NMDAنقش کلیدی در تولید وگسترش حملات صرعی دارند. جلوگیری از رهایش و تاثیر تحریکی گلوتامات از طریق مهار رقابتی رسپتورهای NMDA به عنوان مکانیسم اصلی اثرات ضد صرع این مونوترپن پیشنهاد شده است. در تحقیقات مختلف نشان داده شده است که لینالول اثر ضد تشنجی خود را از طریق اثر مهاری روی متصل شدن گلوتامات در کورتکس موش صحرایی و تاثیر بر روی انتقالات گاباارژیک و گلوتامات ارژیک ایجاد می­نماید  (Brum et al., 2001). de Almedia وهمکاران با توجه به تاثیر این روغن در کاهش تحریک­پذیری عصبی و کاهش دامنه­ پتانسیل عمل در عصب سیاتیک و نظر به فقدان رسپتورهای NMDA یا گابا در تنه­ی عصب پیشنهاد کرده­اند که این تاثیر تا حدودی از طریق تاثیر بر کانال­های یونی مانند مهار کانال­های سدیمی وابسته به ولتاژ یا افزایش کنداکتانس پتاسیمی اعمال می­شود (de Almedia et al., 2009). از آن جایی که تعدیل کانال­های وابسته به ولتاژ به وسیله داروها یک اصل درمانی است، لینالول ممکن است از این طریق با فرآیندهای سلولی مرتبط با صرع تداخل نماید  .(Altrup et al., 2003)

دانشگاه شیراز

دانشکده علوم

پایان نامه کارشناسی ارشد در رشته ­ی زیست شناسی (فیزیولوژی جانوری)

اثرات مجاورت با کورپیریفاس در طی دوره نوزادی بر آستانه تشنج و افسردگی ناشی از کیندلینگ شیمیایی در موش صحرائی

استاد راهنما:

دکتر جعفر وطن پرست

آذر ۱۳۹۲

چکیده

قرار گرفتن مزمن در معرض ترکیبات ارگانوفسفره در طی تکامل مغز، می ­تواند منجر به تغییرات عصبی و رفتاری پایدار شود. این اثرات عمدتا به تغییرات پایدار در سیستم­های نوروترنسمیتری مختلف نسبت داده می­شوند که همچنین ممکن است تعادل بین تحریک و مهار را در مغز تغییر دهد. در این مطالعه ما اثرات قرار گرفتن در معرض غلظتهای پایین کورپیریفاس در دوره نوزادی بر آستانه تشنج حاد ناشی از پنتیلن تترازول در موشهای بالغ و نابالغ را مورد بررسی قرار دادیم. ما همچنین اثرات این تیمار را بر روی رفتارهای مرتبط با افسردگی ناشی از کیندلینگ شیمیایی با پنتیلن تترازول در موش بالغ بررسی کردیم. موشهای نوزاد به صورت زیر جلدی کورپیریفاس (mg/kg 1) یا حجم معادلی از دی متیل سولفوکسید (گروه شاهد) را در روزهای ۴-۱ پس از تولد دریافت کردند. در روزهای ۳۰ و ۶۰ پس از تولد بعضی از موشها از هر گروه برای تعیین زمان شروع اولین علائم تشنج بعد از تزریق داخل صفاقی پنتیلن تترازول ( mg/kg40) و غلظت پنتیلن تترازول مورد نیاز برای القاء تشنج کلونیک مورد استفاده قرار گرفتند. در شروع روز ۶۰ پس از تولد موشهای دیگر با تزریق مکرر پنتیلن تترازول ( mg/kg38) به صورت روز در میان تا ۴ هفته به طریق شیمیایی کیندل شدند. یک هفته پس ار اتمام دوره کیندلینگ، رفتارهای شبه افسردگی با آزمون ترجیح مزه شیرین محلول ساخارین و آزمون شنای اجباری مورد بررسی قرار گرفت. نتایج ما نشان داد مجاورت با کورپیریفاس در دوره نوزادی زمان شروع اولین علائم تشنج و آستانه برای تشنج کلونیک را در موشها در دوره نوجوانی و بلوغ تغییر می­دهد. در بعضی از نمونه­ها این اثرات تنها زمانی مشاهده شد که داروهای ضد تشنج مختلف شامل اسکاپولامین، فنوباریبتال و اتوسوکسیماید به عنوان پیش تیمار قبل از تزریق پنتیلن تترازول مورد استفاده قرار گرفتند. در طی دوره کیندلینگ موشهای ماده از گروه کورپیریفاس درجه تشنج کمتری در مقایسه با گروه شاهد نشان دادند. هیچ تفاوت معنی داری بین دو گروه در تست ترجیح مزه مشاهده نشد. موشهای ماده­ایی که در دوران نوزادی در معرض کورپیریفاس قرار گرفته بودند زمان بیشتری از عدم تحرک را در آزمون شنای اجباری در مقایسه با گروه شاهد نشان دادند. این یافته­ها پیشنهاد می­ کند که قرارگرفتن نوزادان در معرض کورپیریفاس، حساسیت آنها را به تشنج­های صرعی و رفتارهای شاخص افسردگی مرتبط با کیندلینگ تغییر می­دهد. اثر اخیر ممکن است با اختلال در مدارهای سروتونرژیک در موشهای تیمار شده با کورپیریفاس مرتبط باشد.

کلمات کلیدی: کورپیریفاس، تکوین، موش، آستانه تشنج، افسردگی، پنتیلن تترازول

فهرست مطالب

عنوان.صفحه

فصل اول: مقدمه

۱-۱) بیان مساله ۲

۱-۲) ترکیبات ارگانوفسفره ۳

۱-۳) افسردگی  . ۴

فصل دوم: مروری بر اطلاعات موجود

۲-۱) ترکیبات ارگانوفسفره ۸

۲-۲) سیستم سروتونرژیک ۹

۲-۳) تشنج­های صرعی ۱۳

۲-۴) طبقه بندی تشنج­های صرعی ۱۳

۲-۵) مکانیسم تشنج­های صرعی . ۱۴

۲-۶) کیندلینگ . ۱۷

۲-۷) داروهای ضد تشنجی . ۱۸

۲-۷-۱) فنوباربیتال . ۱۹

۲-۷-۲) اتوسوکسیماید ۲۰

۲-۷-۳) اسکاپولامین ۲۱

۲-۸) افسردگی . ۲۳

۲-۹) علل بروز . ۲۳

۲-۱۰) افسردگی و صرع ۲۴

۲-۱۱) ساختارهای مغزی مشترک در افسردگی و صرع ۲۵

۲-۱۲) کیندلینگ در مطالعه ارتباط صرع و افسردگی . ۲۷

۲-۱۳) نقص انتقال سروتونرژیک و افسردگی . ۳۱

۲-۱۴) نقص انتقال سروتونرژیک و صرع ۳۲

۲-۱۵) فلوکسیتین ۳۳

۲-۱۶) تنظیم انتقال سروتونرژیک توسط فلوکسیتین ۳۴

۲-۱۷) هدف .  ۳۵

فصل سوم: مواد و روش­ها

۳-۱) مواد مورد استفاده . ۳۸

۳-۲) وسایل و دستگاه­ها. ۳۹

۳-۳) روش انجام کار ۳۹

۳-۴) آزمون شنای اجباری ۴۱

۳-۵) تست ترجیح مزه . ۴۲

۳-۶) آزمون آماری ۴۳

فصل چهارم: نتایج

۴-۱) تأثیر مجاورت با کورپیریفاس در دوره نوزادی بر تشنچ حاد در ابتدای دوره نوجوانی و بلوغ . ۴۵

۴-۲) تأثیر دریافت کورپیریفاس در ابتدای دوره پس از تولد بر فرایند کیندلینگ در دوره بلوغ ۵۱

۴-۳) تأثیر دریافت کورپیریفاس بر آزمون شنای اجباری بعد از کیندلینگ ۵۳

۴-۴) تأثیر دریافت کورپیریفاس بر آزمون ترجیح مزه بعد از کیندلینگ ۵۴

فصل پنجم: بحث و نتیجه ­گیری

۵-۱) بحث ۵۶

۵-۱-۱) تأثیر کورپیریفاس بر تشنج حاد . ۵۶

۵-۱-۲) تأثیر کورپیریفاس بر کیندلینگ . ۵۸

۵-۱-۳) تأثیر کورپیریفاس بر افسردگی . ۵۹

۵-۲) نتیجه ­گیری ۶۲

۵-۳) پیشنهادات برای مطالعات آینده ۶۳

فهرست منابع و ماخذ ۶۴

فهرست نمودارها

عنوان.صفحه

نمودار۴-۱) مقایسه میانگین تاخیر در شروع اولین علائم تشنج موشهای نر ۳۰ روزه در گروه دریافت کننده کورپیریفاس و شاهد پس از دریافت پیش­تیمارهای مختلف ۴۶

نمودار۴-۲) مقایسه میانگین تاخیر در شروع اولین علائم تشنج موشهای ماده ۳۰ روزه در گروه دریافت کننده کورپیریفاس و شاهد پس از دریافت پیش­تیمارهای مختلف ۴۶

نمودار۴-۳) مقایسه میانگین تاخیر در شروع اولین علائم تشنج موشهای نر ۶۰ روزه در گروه دریافت کننده کورپیریفاس و شاهد پس از دریافت پیش­تیمارهای مختلف ۴۷

نمودار۴-۴) مقایسه میانگین تاخیر در شروع اولین علائم تشنج موشهای ماده ۶۰ روزه در گروه دریافت کننده کورپیریفاس و شاهد پس از دریافت پیش­تیمارهای مختلف . ۴۸

نمودار ۴-۵) مقایسه میانگین غلظت آستانه پنتیلن تترازول برای شروع تشنج موشهای نر ۳۰ روزه در گروه دریافت کننده کورپیریفاس و شاهد پس از دریافت پیش­تیمارهای مختلف . ۴۹

نمودار۴-۶) مقایسه میانگین غلظت آستانه پنتیلن تترازول برای شروع تشنج موشهای ماده ۳۰ روزه در گروه دریافت کننده کورپیریفاس و شاهد پس از دریافت پیش­تیمارهای مختلف ۴۹

نمودار ۴-۷) مقایسه میانگین غلظت آستانه پنتیلن تترازول برای شروع تشنج موشهای نر ۶۰ روزه در گروه دریافت کننده کورپیریفاس و شاهد پس از دریافت پیش­تیمارهای مختلف ۵۰

نمودار۴-۸) مقایسه میانگین غلظت آستانه پنتیلن تترازول برای شروع تشنج موشهای ماده ۶۰ روزه در گروه دریافت کننده کورپیریفاس و شاهد پس از دریافت پیش­تیمارهای مختلف ۵۱

نمودار ۴-۹) مقایسه میانگین شدت فعالیت صرعی در طی دوره کیندلینگ با پنتیلن­تترازول بین موشهای نر از گروه دریافت کننده کورپیریفاس و گروه شاهد ۵۲

نمودار ۴-۱۰) مقایسه میانگین شدت فعالیت صرعی در طی دوره کیندلینگ با پنتیلن­تترازول بین موشهای ماده از گروه دریافت کننده کورپیریفاس و گروه شاهد ۵۲

نمودار ۴-۱۱) مقایسه میانگین مدت زمان عدم تحرک در آزمون شنای اجباری در روز اول بین گروه های دریافت کننده کورپیریفاس و شاهد ۵۳

نمودار ۴-۱۲) مقایسه میانگین مدت زمان عدم تحرک در آزمون شنای اجباری در روز دوم (پس از دریافت فلوکسیتین) بین گروه های دریافت کننده کورپیریفاس و شاهد ۵۳

نمودار ۴-۱۳) مقایسه بین گروه های دریافت کننده کورپیریفاس و گروه شاهد براساس ترجیح محلول ساخارین به آب در آزمون ترجیح مزه ۵۴

تعداد صفحه : ۹۸

قیمت : ۱۴۷۰۰ تومان

فهرست مطالب:
چکیده-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد——- ۱
فصل اول « کلیات تحقیق »
۱-۱-بار لرزه ای—————- ۳
۱-۱-۱بارگذاری سازه———— ۳
۱-۱-۱-۱-محاسبه غیر دقیق  این بارها————- ۳
۱-۱-۱-۲-توزیع بار لرزه ای—— ۵
۱-۱-۱-۳-نتیجه گیری———- ۷
۱-۱-۱-۴ راه حل چیست؟- ۷
۱-۲-۱-مزایای استفاده از تحلیل پوش آور———– ۸
۱-۲-۲- معایب استفاده از تحلیل پوش آور———- ۸
۱-۳ چگونگی انجام تحلیل پوش آور—————- ۹
۱-۴ نتیجه گیری از بحث های گذشته و تعیین هدف– ۱۲
فصل دوم « محدوده تخریب قاب های خمشی بتنی تحت بارهای لرزه ای بوسیله مقایسه با تحلیل استاتیکی غیر خطی »
۲-۱ خلاصه-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد– ۱۵
۲-۲ مقدمه-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد— ۱۷
۲-۳ ضریب بار فروریزش——— ۱۹
۲-۴ ضریب حد بالای فروریزش—- ۲۱
۲-۵ ضریب حد پائین فروریزش— ۲۵
۲-۶تحلیل گام به گام برای یک قاب ساده با اثر متقابل P-Mبلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد———– ۳۰
۲-۷ مباحثات و تحقیقات عددی- ۴۸
۲-۸ نتایج- ۵۳
فصل سوم « محدوده تخریب قاب های فولادی تحت بارهای لرزه ای بوسیله مقایسه با تحلیل استاتیکی غیر خطی »
۳-۱مدلسازی و تحلیل ها ۵۵
۳-۱-۱قاب یک دهانه –یک طبقه ۵۶
۳-۱-۲قاب یک دهانه –دو طبقه ۵۹
۳-۱-۳قاب یک دهانه –سه طبقه ۶۲
۳-۱-۴قاب یک دهانه –چهار طبقه ۶۶
۳-۱-۵قاب چهار دهانه –یک طبقه ۷۰
۳-۱-۶قاب چهار دهانه –دو طبقه ۷۳
۳-۱-۷قاب چهار دهانه –سه طبقه- ۷۶
۳-۱-۸قاب چهار دهانه –چهار طبقه—————- ۷۹
۳-۱-۹قاب شش دهانه –یک طبقه- ۸۳
۳-۱-۱۰قاب شش دهانه -دو طبقه- ۸۶
۳-۱-۱۱قاب شش دهانه –سه طبقه—————- ۸۹
۳-۱-۱۲قاب شش دهانه –چهار طبقه————– ۹۳
۳-۱-۱۳قاب شش دهانه –پنج طبقه————— ۹۶
۳-۱-۱۴قاب پنج دهانه –هفت طبقه————— ۱۰۰
۳-۱-۱۵قاب پنج دهانه –هشت طبقه————— ۱۰۴
۳-۱-۱۶قاب پنج دهانه –نه طبقه– ۱۰۸
۳-۱-۱۷قاب پنج دهانه –ده طبقه- ۱۱۲
۳-۱-۱۸قاب پنج دهانه –پانزده طبقه————— ۱۱۷
فصل چهارم « نتیجه گیری »
منابع و مأخذ-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد– ۱۳۱
چکیده
در روش‌های طراحی لرزه‌ای متداول، طراحی مقدماتی بیشتر ساختمان‌ها براساس نیروهای استاتیکی معادل پایه‌گذاری شده است.طریقه توزیع این نیروهای استاتیکی به انتخاب و با قضاوت مهندسی به نظر می‌رسد(مقدم ۲۰۰۹). همچنین توزیع این نیروهای استاتیکی در ارتفاع (و درنتیجه سختی و مقاومت آنها) براساس مدهای ارتعاشی الاستیک می‌باشد (Green, 1981).بهرحال، ساختمان‌ها درطول چند زلزله نمی‌توانند الاستیک باقی بمانند و معمولاً دستخوش تغییرشکل غیرخطی می‌شوند. بنابراین، بکارگیری چنین قراردادی در توزیع نیروهای لرزه‌ای، لزوماً بهترین عملکرد سازه را منجر نمی‌شود(کرمی ۲۰۰۴). بهرحال در آئین‌نامه‌های مدرن طراحی براساس عملکرد، پایه طراحی از مقاومت به سمت تغییرشکل‌ها به پیش می‌رود. (مقدم، سال۲۰۰۹). همانگونه که بیان گردید تحلیل استاتیکی خطی نمی تواند رفتار واقعی سازه را نشان دهد. ازطرفی تحلیل سازه‌ها براساس بارهای دینامیکی نیز مشکلات خاص خود را دارد. برخی از این مشکلات عبارتند از:
۱) نبود دانش فنی
۲) کمبود متخصص این فن
۳) زمان‌بر بودن و به طبع آن هزینه‌بر بودن این نوع تحلیل سازه‌ها
در این پایان نامه ضرایب تخریب قابهای ساختمانی فولادی با شرایط متفاوت با روندهای متفاوت برآورد شده است این روندها عبارتند از:
۱- تحلیل پوش آور غیر خطی کنترل شونده توسط تغییر شکل ۲- حدود بالا و یا تئوری جنبشی ۳- حدود پائین و یا تئوری استاتیک. می‌توان نتایج را مشاهده و مقایسه نمود.
تعداد صفحه : ۱۴۳
قیمت : ۱۴۷۰۰ تومان

دانشگاه شیراز 

دانشکده علوم

پایان نامه کارشناسی ارشد در رشته زیست شناسی( فیزیولوژی جانوری)

اثرات مجاورت با کورپیریفاس در طی دوره نوزادی بر نقص حافظه فضایی ناشی از کیندلینگ شیمیایی در موش­های صحرایی بالغ

استاد راهنما:

دکتر جعفر وطن پرست

آبان ۱۳۹۲

 
 
 
چکیده
ترکیب ارگانوفسفره کورپیریفاس بطور گسترده بعنوان حشره­کش در سراسر جهان استفاده می­شود. مجاورت با کورپیریفاس در طی دوره تکوین از طریق مکانیسم­هایی غیر از مهار کولین­استراز نقایص عصبی-رفتاری طولانی مدت را به دنبال دارد. در این مطالعه با بهره گرفتن از آزمون ماز شعایی اثر دریافت غلظت پایین کورپیریفاس در دوره نوزادی بر نقائص شناختی ناشی از کیندلینگ شیمییایی مطالعه شد. نوزادان گروه آزمایش کورپیریفاس را به میزان  mg/kg1 در روزهای ۴-۱ بعد از تولد دریافت کردند و گروه شاهد حجم برابری از حلال (دی­متیل­سولفوکساید) را دریافت کردند. برای کیندلینگ، موش­های صحرایی بالغ از هر دو گروه، پنتیل­تترازول را به میزان  mg/kg38 به­صورت داخل صفاقی هر دو روز یکبار به­مدت ۲۸ روز دریافت کردند. موشهایی که کیندل شده و بطور مکرر تشنجات کلونیک نشان دادند جهت مطالعه رفتاری مورد استفاده قرار گرفتند. همچنین در هردو گروه تاثیر پیش­تیمار اسکاپولامین (آنتاگونیست موسکارینی) و MK-801 (آنتاگونیست گیرنده NMDA) برای تعیین میزان وابستگی عملکرد شناختی به سیستم­های کولینرژیک و گلوتاماترژیک مورد بررسی قرار گرفت. در طی کیندلینگ موش­های نر و ماده گروه کورپیریفاس درجه تشنج کمتری در مقایسه با گروه دریافت کنندهDMSO  نشان دادند و این اختلاف در موش­های ماده گروه کورپیریفاس در برخی روزهای دوره کیندلینگ معنی دار بود. پس از کیندلینگ موش­های صحرایی نر گروه کورپیریفاس در مقایسه با گروه شاهد، خطاهای حافظه مرجع کمتری نشان دادند در حالیکه موش­های ماده گروه کورپیریفاس پس از کیندلینگ در مقایسه با موشهای ماده از گروه شاهد، خطاهای حافظه کاری بیشتری نشان دادند. پیش­تیمار حیوانات با اسکاپولامین و MK-801 نشان داد که این داروها خطای حافظه فضایی موش­های صحرایی گروه کورپیریفاس را بیش از گروه شاهد افزایش می­دهد که پیشنهاد می­ کند در این گروه وابستگی حافظه فضایی به سیستم­های کولینرژیک و گلوتاماترژیک بیش از گروه DMSO است. فرایند کیندلینگ با افزایش فعالیت سیستم کولینرژیک و گلوتاماترژیک همراه است که از طریق آسیب نورونی سبب نقص عملکردی این سیستم­های نوروترنسمیتری می­شود. نشان داده شده که دریافت کورپیریفاس در دوره نوزادی کاهش فعالیت سیستم های کولینرژیک و گلوتاماترژیک را باعث می­شود که احتمالاً در کاهش درجه تشنج در طی کیندلینگ و نیز کاهش آسیب این سیستم­های نروترنسمیتری در نتیجه کیندلینگ در موشهای گروه کورپیریفاس دخیل است.
کلمات کلیدی: کورپیریفاس، کیندلینگ شیمیایی، تکوین، حافظه فضایی، موش صحرایی
 
 
 
فهرست مطالب
 
 
عنوانصفحه
 
فصل اول: مقدمه
۱-۱) بیان مساله۲
۱-۱-۱) ترکیبات ارگانوفسفره۲
۱-۲) صرع.۴
۱-۳) طبقه بندی صرع۵
۱-۴) کیندلینگ۶
۱-۵) یادگیری و حافظه.۶
فصل دوم: مروری بر تحقیقات پیشین
۲-۱) ویژگی­ها و مکانیسم تاثیر ترکیبات ارگانوفسفره.۹
۲-۲) اثرات بیولوژیک کورپیریفاس.۱۰
۲-۳) تاثیر وابسته به زمان و وابسته به جنس ترکیبات ارگانوفسفره۱۱
۲-۴) تاثیر ارگانوفسفره­ها به ویژه کورپیریفاس در ایجاد افسردگی و نقص حافظه ناشی از تغییر در سیستم­های نوروترنسمیتری۱۲
۲-۵) مکانیسم ایجاد صرع۱۳
۲-۶) مدل کیندلینگ در مطالعه صرع۱۶
۲-۷) ساختارهای مغزی و سیستم­های نوروترنسمیتری دخیل در حافظه۱۷
۲-۸) تاثیر صرع بر یادگیری و حافظه.۲۳
۲-۹) هدف.۲۴
فصل سوم: مواد و روش­ها
۳-۱) مواد مورد استفاده۲۶
۳-۲) وسایل و دستگاه­ها۲۷
۳-۳) حیوانات و تیمار.۲۷
۳-۴) کیندلینگ.۲۸
۳-۵) آزمون یادگیری حافظه فضایی با ماز شعاعی هشت بازویی.۲۹
۳-۵-۱) مراحل انجام آزمایش.۳۰
۳-۶) آنالیز آماری.۳۰
فصل چهارم: نتایج
۴-۱) تاثیر کورپیریفاس بر کیندلینگ۳۳
۴-۲) آزمون یادگیری فضایی۳۵
 
فصل پنجم: بحث و نتیجه گیری
۵-۱) بحث.۴۷
۵-۲) نتیجه گیری کلی.۵۳
۵-۳) پیشنهادات برای مطالعات آینده۵۳
فهرست منابع و ماخذ۵۴
 
 
 
فهرست نمودارها
 
 
عنوانصفحه
 
نمودار۴-۱) مقایسه میانگین درجه تشنج بین گروه­های کورپیریفاس و DMSO در روزهای مختلف القاء کیندلینگ در موش­های صحرایی نر.۳۴
نمودار۴-۲) مقایسه میانگین درجه تشنج بین گروه­های کورپیریفاس وDMSO در روزهای مختلف القاء کیندلینگ در موش­های صحرایی ماده۳۴
نمودار۴-۳) مقایسه میانگین خطاهای حافظه مرجع موش­های صحرایی نر در روزهای
مختلف بین گروه­های کورپیریفاس و DMSO.37
نمودار۴-۴) مقایسه میانگین خطاهای حافظه مرجع موش­های صحرایی ماده در روزهای
مختلف بین گروه­های کورپیریفاس و DMSO.37
نمودار ۴-۵) مقایسه میانگین خطاهای حافظه کاری موش­های صحرایی نر در روزهای
مختلف بین گروه­های کورپیریفاس و DMSO38
نمودار۴-۶) مقایسه میانگین خطاهای حافظه کاری موش­های صحرایی ماده در روزهای
مختلف بین گروه­های کورپیریفاس و DMSO38
نمودار ۴-۷) مقایسه میانگین خطاهای حافظه مرجع موش­های صحرایی نر در اثر تزریق
غلظت­های مختلف اسکاپولامین در گروه­های کورپیریفاس و DMSO39
نمودار۴-۸) مقایسه میانگین خطاهای حافظه مرجع موش­های صحرایی ماده در اثر تزریق
غلظت­های مختلف اسکاپولامین در گروه­های کورپیریفاس و DMSO39
نمودار ۴-۹) مقایسه میانگین خطاهای حافظه مرجع موش­های صحرایی نر در اثر تزریق
غلظت­های مختلف MK-801 در گروه­های کورپیریفاس و DMSO.40
نمودار ۴-۱۰) مقایسه میانگین خطاهای حافظه مرجع موش­های صحرایی ماده در اثر تزریق
غلظت­های مختلف MK-801 در گروه­های کورپیریفاس و DMSO40
نمودار ۴-۱۱) مقایسه میانگین خطاهای حافظه کاری موش­های صحرایی نر در اثر تزریق
غلظت­های مختلف اسکاپولامین در گروه­های کورپیریفاس و DMSO41
نمودار ۴-۱۲) مقایسه میانگین خطاهای حافظه کاری موش­های صحرایی ماده در اثر تزریق
غلظت­های مختلف اسکاپولامین در گروه­های کورپیریفاس و DMSO41
نمودار ۴-۱۳) مقایسه میانگین خطاهای حافظه کاری موش­های صحرایی نر در اثر تزریق
غلظت­های مختلف MK-801 در گروه­های کورپیریفاس و DMSO42
نمودار ۴-۱۴) مقایسه میانگین خطاهای حافظه کاری موش­های صحرایی ماده در اثر تزریق
غلظت­های مختلف MK-801 در گروه­های کورپیریفاس و DMSO42
نمودار ۴-۱۵) مقایسه میانگین شاخص­های حافظه موش­های صحرایی نر در روزهای مختلف بین گروه کورپیریفاس و DMSO.43
نمودار ۴-۱۶) مقایسه میانگین شاخص­های حافظه موش­های صحرایی ماده در روزهای مختلف بین گروه کورپیریفاس و DMSO.43
نمودار ۴-۱۷) مقایسه میانگین شاخص­های حافظه موش­های صحرایی نر متعاقب تزریق غلظت های مختلف اسکاپولامین بین گروه کورپیریفاس و DMSO.44
نمودار ۴-۱۸) مقایسه میانگین شاخص­های حافظه موش­های صحرایی ماده متعاقب تزریق غلظت­های مختلف اسکاپولامین بین گروه کورپیریفاس و DMSO44
نمودار ۴-۱۹) مقایسه میانگین شاخص­های حافظه موش­های صحرایی نر متعاقب تزریق غلظت های مختلف MK-801 بین گروه کورپیریفاس و DMSO45
نمودار ۴-۲۰) مقایسه میانگین شاخص­های حافظه موش­های صحرایی ماده متعاقب تزریق غلظت­های مختلف MK-801 بین گروه کورپیریفاس و DMSO.45
بیان مساله:
 
۱-۱-۱ (ترکیبات ارگانوفسفره[۱]
 
ترکیبات ارگانوفسفره به ­عنوان حشره­کش در کشاورزی، دامپروری و حتی مصارف خانگی استفاده می­شوند. علیرغم محدودیت­های اعمال شده در جهت کاهش تولید و مصرف این ترکیبات، هنوز بیش از نیمی از حشره­کش­های مصرفی حاوی ترکیبات ارگانوفسفره هستند که از جمله مهم­ترین آلاینده­های محیط زیست هستند (Fenske et al., 1990; Eskenazi et al.,1999) استفاده از حشره­کش­های ارگانوفسفره به­دلیل اثرات مخربی که بر رشد مغز دارند در سال­های اخیر محدود شده، با این حال مصرف بعضی از این ارگانوفسفره­ها مثل کورپیریفاس[۲] به دلیل پایداری بیشتر و سمیت سیستمیک کمتر هنوز ادامه دارد (U. S. EPA 2004). مسمومیت با ترکیبات ارگانوفسفره اثرات متنوعی روی سیستم­های مختلف محیطی و مرکزی دارد.
درکلینیک مسمومیت با ترکیبات ارگانوفسفره غالباً با میزان مهار استیل­کولین­استراز[۳] سنجش می­شود (Ricceri et al., 2003; Jamson et al., 2007). یکی از تاثیرات این مهار، تحریک بیش از حد سیناپس­های کولینرژیک و سیستم عصبی پاراسمپاتیک است که نشانه­ های آن شامل تنگ شدن مجاری هوایی، تعریق، ترشح بزاق، بی اشتهایی، انقباضات شکمی، استفراغ، بی اختیاری مدفوع و افزایش ادرار می­باشد. همچنین ارگانوفسفره­ها باعث ایجاد تیک­های ماهیچه­ای و انقباضات کوچک و غیر­ارادی عضلات در زیر پوست می­شوند. این تاثیرات، ماهیچه­های تنفسی را نیز درگیر می­ کنند. ترکیبات ارگانوفسفره قادرند بر روی سیستم عصبی مرکزی نیز تاثیر بگذارند که نتیجه آن، اضطراب، تخریب حافظه، نقص در سخن گفتن، تشنج و کما می­باشد  .(Dubois, 1971)ارگانوفسفره­های مختلف تاثیرات سمی متفاوتی بر روی سیستم عصبی دارند، بعضی از ارگانوفسفره­ها ازجمله کورپیریفاس تاثیرات سمی بیشتری روی سیستم عصبی دارند،در حالیکه سمیت برخی دیگر مانند پاراتیون بیشتر سیستمیک است(Timofeeva et al., 2008).ترکیبات ارگانوفسفره به­دلیل اثرات مخرب طولانی­مدت بر مغز درصورت مجاورت در دوران جنینی و کودکی از نظر پزشکی مورد توجه هستند . (Ricceriet al., 2003)اثرات سمی ارگانوفسفره­ها روی مغز در حال تکوین بیشتر است که یکی از دلایل آن مصرف بالای اکسیژن و کمبود آنتی­اکسیدان در مغز در حال تکوین می­باشد (Slotkin et al., 2008) به عنوان مثال LD50 ترکیب کورپیریفاس در نوزادان موش صحرایی ۱۰۰ برابر کمتر از بالغین است (Jameson et al.,2007). مطالعات مختلف نشان داده­اند برخی از ارگانوفسفره­ها در غلظت­هایی که مسمومیت سیستمیک را به دنبال ندارند، به­طورخاص مغز نابالغ را هدف قرار داده و اختلالات رفتاری دراز مدت را باعث می­شوند (Ricceri et al., 2003,2006;Eskenazi et al., 1999) کورپیریفاس و نه متابولیت فعال آن (کورپیریفاس[۴] اکسان) سنتز DNA را مهار کرده و باعث کاهش تعداد سلول­ها و اختلال در فعالیت سیناپسی می­شود.بنابراین عجیب نیست که کورپیریفاس در غلظت­هایی که مهار استیل­کولین­استراز پایین­تر از حد لازم برای ایجاد مسمویت سیستمیک است، اختلالات رفتاری دراز مدت را باعث می­شود (Crumpton et al., 2000; Levin et al., 2007; Jameson et al., 2007; Terry et al., 2007; Johnson et al., 2009).
[۱]Organophosphate compounds
[۲]Chlorpyrifos
[۳]Acetyl cholinestrase
[۴] Chlorpyrifos oxon
تعداد صفحه : ۸۹
قیمت : ۱۴۷۰۰ تومان